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色谱柱的平衡和使用-【新闻】裁刀

发布时间:2021-04-20 12:27:11 阅读: 来源:原液厂家

色谱柱的平衡和使用

反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇/水中的。请一定确保您所使用的流动相和甲醇/水互溶,由于色谱柱在运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用分22-22倍的体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。

如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用含水量很高的流动相过渡,样品分析完后,冲洗柱子是亦然。过去传统的方法使用纯水冲洗,对于非极性柱,如C8或C28,由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链,造成柱效下降。

另外,分析样品时,由于纯水在填料表面不能浸润形成水膜,出现样品不保留而分不开,重现性差,所以对于一般的C28或C8,有机溶剂不能低于5%。硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水或甲醇或乙腈的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。

如何平衡色谱柱:

平衡过程中,将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线。

色谱柱的再生:

建议用来冲洗的溶剂体积

色谱柱规格 柱体积 溶剂体积

252×4.6 2.52ml 52ml

252×4.6 5.2ml 222ml

252×22 22ml 422ml

请根据下表选择您的再生方法:

极性固定相的再生:正庚烷—氯仿—乙酸乙酯—丙酮—乙醇—水

非极性固定相的再生:水—乙腈—氯仿—乙腈—水

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